prozyme PNGase F產(chǎn)品
PNGase F，肽-N- 糖苷酶F，肽-N 4 - （N- 乙?；?β-葡糖胺基）天冬酰胺酰胺酶，通過切割N-聚糖 的內(nèi)部GlcNAc和天冬酰胺（Asn）之間的切割，從而獲得完整的N-聚糖。）N-聚糖與肽連接的殘基。
通過用熱/ SDS處理使糖蛋白底物預(yù)先變性大大提高了N-聚糖去除的速率和可靠性，盡管在較高濃度下酶可以在天然條件下從糖蛋白中除去完整的聚糖。使用PNGase F進(jìn)行快速（5分鐘）去糖基化是我們Gly- X樣品制備平臺的一部分。
我們提供了許多不同的配方和包裝尺寸的PNGase F：
產(chǎn)品/包裝尺寸 | 濃度 | 重組 | EDTA |
GKE-5006A （100 mU）， GKE-5006B （200 mU）， GKE-5006D （1 U） | ≥2.5U / ml | ? | 1mM的 |
GKE-5016A （100 mU）， GKE-5016B （200 mU）， GKE-5016D （1 U） | ≥2.5U / ml | ? | 0 |
GKE-5016B （200 mU）， GKE-5016D （1U） | ≥10U / ml | ? | 1 mM |
GKE-5020B （200 mU）， GKE-5020D （1 U） | ≥10U / ml | ? | 0 |
GKE-5003 （100 mU） | ≥2.0U / ml |
| 5 mM |
一個單位的N-聚糖酶定義為在pH7.5和37℃下每分鐘催化1μmole變性核糖核酸酶B釋放N-連接寡糖所需的酶量。
緩沖劑和變性劑不提供1 U“D”包裝尺寸，但可根據(jù)要求提供。
歷*將EDTA包括在天然PNGase F制劑中作為穩(wěn)定劑。對于GKE-5020配方，我們重新考慮了這個想法，因?yàn)榭蛻粢蟛皇褂肊DTA的PNGase F配方。我們相信穩(wěn)定性不如酶的重組形式所關(guān)注。
尺寸
500個單位
選擇目錄號： V4831
PNGase F（肽 N-糖苷酶 F）是一個重組糖苷酶，從 Elizabeth-kingia miricola 克隆，并在大腸桿菌中過表達(dá)獲得。PNGase F 的分子量為 36kDa, 可以在 N-連糖蛋白的高甘露糖、雜合和復(fù)合寡糖部分內(nèi)側(cè)的 N- 乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和天冬酰氨殘基之間進(jìn)行切割（圖1）。PNGase F 不會去除常見植物糖蛋白上含有核心α-(1,3)- 巖藻糖連接的寡糖。
單位定義：一單位 PNGase F 指在 37℃可以 1 分鐘內(nèi)催化 1nm 變性核糖核酸酶 B（RNase B）去糖基化所需 PNGase F 的量。1 Promega 單位等于 1 IUB 毫單位。
分子量：PNGase F 分子量約為 36kDa 。
物理形態(tài)：PNGase F 溶于 20mM Tris-HCl（pH 7.5，25℃），50mM NaCl和 5mM EDTA緩沖液中，濃度為10,000u/ml。
應(yīng)用：
• 蛋白是否被糖基化的特征
• 確定蛋白的糖基化位點(diǎn)
• 聚糖結(jié)構(gòu)特征
• 蛋白運(yùn)輸
PNGase F對N-聚糖的切割特異性。
重組PNGase F使多種底物去糖基化。
示意圖說明了PNGase F的使用和N-糖基化的質(zhì)譜分析。
