BD 2939-CA說(shuō)明書(shū)

Recombinant Human Carbonic Anhydrase VI Protein, CF

2939-CA

重組人碳酸酐酶VI蛋白，CF摘要

純度

> 90％，在還原條件下通過(guò)SDS-PAGE并通過(guò)銀染可視化

內(nèi)毒素水平

通過(guò)LAL方法，每1μg蛋白質(zhì)<1.0 EU。

活動(dòng)

通過(guò)其酯酶活性測(cè)量。在所述條件下測(cè)得的比活度＞ 3pmol/min/μg。

資源

小鼠骨髓瘤細(xì)胞系，NS0衍生的人碳酸酐酶VI蛋白
Gln18-Asn308，具有C末端10-His標(biāo)簽

登記號(hào)

EAW71606

N端序列
分析

未獲得結(jié)果：Gln18預(yù)測(cè)

預(yù)測(cè)分子量

35 kDa

SDS頁(yè)面

42 kDa，還原條件

CF是什么意思？

CF代表無(wú)載波（CF）。我們通常將牛血清白蛋白（BSA）作為載體蛋白添加到我們的重組蛋白中。添加載體蛋白可增強(qiáng)蛋白穩(wěn)定性，延長(zhǎng)保質(zhì)期，并使重組蛋白以更稀的濃度存儲(chǔ)。運(yùn)營(yíng)商免費(fèi)版不包含BSA。

什么配方適合我？

通常，我們建議購(gòu)買(mǎi)帶有BSA的重組蛋白，用于細(xì)胞或組織培養(yǎng)，或作為ELISA標(biāo)準(zhǔn)。相反，建議將無(wú)載體蛋白質(zhì)用于BSA的存在可能會(huì)干擾的應(yīng)用。

2939-CA

測(cè)定步驟

用料

• 測(cè)定緩沖液：12.5 mM Tris，75 mM NaCl，pH 7.5
• 重組人碳酸酐酶VI（rhCA6）（目錄號(hào)2939-CA）
• 底物：乙酸4-硝基苯酯（4-NPA）（Sigma，貨號(hào)N8130），100 mM丙酮儲(chǔ)備
• 96孔透明板（Costar，目錄號(hào)92592）
• 酶標(biāo)儀（型號(hào)：Molecular Devices的SpectraMax Plus）或同等產(chǎn)品

1. 在測(cè)定緩沖液中將rhCA6稀釋至50 ng / µL。
2. 在測(cè)定緩沖液中將底物稀釋至2 mM。
3. 將50 µL 50 ng / µL rhCA6裝入板中，并通過(guò)添加50 µL 2 mM底物開(kāi)始反應(yīng)。包括一個(gè)含有50 µL分析緩沖液和50 µL 2 mM底物的底物空白。
4. 在動(dòng)力學(xué)模式下以400 nm波長(zhǎng)讀取（底部讀?。?分鐘。
5. 計(jì)算比活：

     *針對(duì)基材空白進(jìn)行了調(diào)整
     **使用校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)4-硝基苯酚（Sigma，目錄號(hào)241326）得出。

每口井：

• rhCA6：2.5 µg
• 底物：1 mM

背景：碳酸酐酶VI

碳酸酐酶催化CO的可逆反應(yīng)₂ + H ₂ O = HCO ₃ ^- + H ⁺，這是許多過(guò)程，諸如呼吸，腎小管酸化和骨吸收（1）的基礎(chǔ)。CA會(huì)議（^第六屆CA會(huì)議，2003年6月20日至25日，斯洛伐克）的主題涉及在臨床中使用CA作為腫瘤和缺氧的標(biāo)志物，作為牛奶中的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑以及將其用作工具的范圍。用于CO ₂工業(yè)中的除蟲(chóng)和滅蚊。碳酸酐酶VI，也稱(chēng)為gustin和唾液碳酸酐酶，是一種鋅金屬蛋白，約占人腮腺唾液蛋白的3％（2、3）。有味覺(jué)喪失和味蕾的病理變化的患者中糖脂減少（4）。它也是牛奶的基本成分。它在嬰兒消化道的正常生長(zhǎng)和發(fā)育中起著重要作用（5）。

參考文獻(xiàn)

1. Hewett-Emmett，D.和RE Tashian（1996）系統(tǒng)發(fā)育 進(jìn)化 5：50。
2. Murakami，H.和Sly，WS（1987）J.Biol?；瘜W(xué) 262：1382。
3. 撒切爾，BJ 等。（1998）生物化學(xué)。生物物理學(xué)。Res。公社 250：635。
4. 漢金，RI 等。（1999）Am。J. Med?？茖W(xué) 318：380。
5. Karhumaa，P。等。（2001年）過(guò)程。Natl。學(xué)院 科學(xué) 美國(guó)。98：11604。

Entrez基因ID

765（人類(lèi)）; 298657（大鼠）

備用名

CA6; 碳酸鹽脫水酶VI；碳酸酐酶6; 碳酸酐酶VI; 碳酸酐酶VIGUSTIN; CA-VI；EC 4.2.1.1；古斯汀 MGC21256；唾液碳酸酐酶；分泌的碳酸酐酶