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技術(shù)文章

qa-bio單糖

 更新時(shí)間:2020-01-21 點(diǎn)擊量:1922

 

 

 

qa-bio單糖

自2002年以來(lái),我們的單糖標(biāo)準(zhǔn)品已被制藥和生物技術(shù)公司用于FDA和EMEA批準(zhǔn)的測(cè)定中。它們通過(guò)MS,HPLC和NMR分析合格,可以滿足我們嚴(yán)格的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),并且不含鹽或其他添加劑,這些鹽或其他添加劑可能會(huì)干擾要求純度的高級(jí)分析技術(shù)(例如質(zhì)譜)。

定量單糖標(biāo)準(zhǔn)

單糖標(biāo)準(zhǔn)品–定量Monomix

六個(gè)單糖的定量混合物:
氨基葡萄糖-半乳糖胺-半乳糖-甘露糖-葡萄糖/葡萄糖-巖藻糖

每個(gè)小瓶中的每個(gè)單糖10納摩爾

6種單糖標(biāo)準(zhǔn)品各10摩爾

 

CM-MONOMIX-10-1小瓶
CM-MONOMIX-10X3-3小瓶

 

 

單糖標(biāo)準(zhǔn)品-定量Monomix

六個(gè)單糖的定量混合物:
氨基葡萄糖–半乳糖胺–半乳糖–甘露糖–葡萄糖/葡萄糖–巖藻糖

每個(gè)小瓶中的每個(gè)單糖10納摩爾

6種單糖標(biāo)準(zhǔn)品各10摩爾

 

CM-MONOMIX-10 – 1小瓶
CM-MONOMIX-10X3 – 3小瓶

單糖標(biāo)準(zhǔn)品是由NIST-F和USP可追溯單糖混合物組成的定量標(biāo)準(zhǔn)品,包括葡萄糖胺(GlcN),半乳糖胺(GalN),半乳糖(Gal),甘露糖(Man),葡萄糖/葡萄糖(Glc)和巖藻糖(Fuc) 。

單糖分析指南

monomix標(biāo)準(zhǔn)品可以進(jìn)行儀器校準(zhǔn),以便定量確定糖蛋白中的單糖成分。我們建議將五點(diǎn)校準(zhǔn)曲線用于monomix標(biāo)準(zhǔn)品。單糖分析工具包文檔中說(shuō)明了有關(guān)如何執(zhí)行此操作的信息。

單糖標(biāo)準(zhǔn)品的HPLC分析

HPLC分析2-AA標(biāo)記的單糖是測(cè)定糖蛋白樣品中單糖水平的可靠方法。為了實(shí)現(xiàn)有效的數(shù)據(jù)解釋,需要理解一些重要的問(wèn)題。

1.每個(gè)單糖的每nmol熒光產(chǎn)量不同。需要確定單糖濃度對(duì)熒光的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2. 2-AA標(biāo)記后,不從樣品中除去游離染料,以確保在染料清除階段不會(huì)丟失單糖。游離染料在大約15分鐘時(shí)以較大的偏峰洗脫,在28分鐘后也以幾個(gè)較大的峰洗脫。

3.在該方法的酸水解步驟中,N-乙酰氨基葡糖胺和N-乙酰半乳糖胺均被脫N-乙?;?,以分別產(chǎn)生葡糖胺和半乳糖胺。

4.葡萄糖胺進(jìn)行約4%的差向異構(gòu)化,產(chǎn)生甘露糖胺。甘露糖胺在半乳糖胺峰之前洗脫,沒(méi)有基線分辨率。

5.半乳糖胺還會(huì)產(chǎn)生差向異構(gòu)體峰,通常小于2%。但是,該差向異構(gòu)體峰經(jīng)常被游離染料峰洗脫。

6.使用木糖作為內(nèi)標(biāo)可以直接比較樣品。這樣可以補(bǔ)償樣品處理過(guò)程中可能發(fā)生的任何移液/樣品制備錯(cuò)誤。

7.樣品穩(wěn)定性–如果打算將標(biāo)記的樣品存放超過(guò)一周,我們建議將其保存在-20°C的冰箱中。

 

單糖標(biāo)準(zhǔn)
2-氨基苯甲酸(2-AA)標(biāo)記的單混合物的LudgerSep-uR2 HPLC圖譜。2至3分鐘之間的峰是游離染料。

形式:干燥。通過(guò)從水溶液中離心蒸發(fā)進(jìn)行干燥。

數(shù)量:6種單糖標(biāo)準(zhǔn)溶液各10 nmol

儲(chǔ)存:  溶解前和溶解后均為-20 °C。該產(chǎn)品在提供時(shí)至少穩(wěn)定5年。
 

運(yùn)輸:單糖標(biāo)準(zhǔn)品在干燥時(shí)可以在室溫下運(yùn)輸。溶解后,在干冰上運(yùn)輸。

處理:讓未打開(kāi)的小瓶達(dá)到環(huán)境溫度,并在固體表面上未打開(kāi)的拍打,以確保大多數(shù)凍干的材料在小瓶的底部。輕輕取下蓋子,加入所需體積的重組培養(yǎng)基,重新蓋好蓋子并充分混合,以使所有的寡糖進(jìn)入溶液。為了大程度地回收低聚糖,請(qǐng)確保在使用前也沖洗了瓶蓋襯里并短暫地離心了重新配制的小瓶。確保使用的任何玻璃,塑料制品或溶劑均不含糖苷酶和環(huán)境碳水化合物。盡量減少暴露于高溫或pH值。高溫和低pH將導(dǎo)致脫唾液酸化。高pH值將導(dǎo)致還原末端GlcNAc的差向異構(gòu)化。

安全性:本產(chǎn)品是非危險(xiǎn)品,并已從經(jīng)認(rèn)證不含任何有害物質(zhì)(包括病原性生物制劑)的天然來(lái)源中純化。

 

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