bellbrooklabs Transcreener®ADP²激酶測(cè)定
可直接檢測(cè)ADP 的僅有激酶檢測(cè)方法

轉(zhuǎn)座子激酶測(cè)定原理

Transcreener分析是一種混合閱讀形式的競(jìng)爭(zhēng)性免疫分析。示蹤劑與ADP抗體的置換引起其熒光特性的變化。Transcreener是測(cè)量激酶反應(yīng)過(guò)程中形成的ADP的簡(jiǎn)單，直接的方法。自2006年推出一款產(chǎn)品以來(lái)，Transcreener已在數(shù)百萬(wàn)口井中用于高溫超導(dǎo)和發(fā)現(xiàn)鉛。

生化激酶測(cè)定試劑盒提供遠(yuǎn)紅外FP，F(xiàn)I和TR-FRET檢測(cè)模式，以確保您的酶標(biāo)儀具有良好性能。

主力軍。用于許多大屏幕。良好的甲板和信號(hào)穩(wěn)定性。

正FI信號(hào)。與簡(jiǎn)單的熒光酶標(biāo)儀兼容。讀取時(shí)間比FP或TR-FRET更快。

對(duì)于喜歡TR-FRET檢測(cè)的客戶。使用相同的過(guò)濾器設(shè)置為HTRF ^®。

Transcreener是通用的–幾乎可與任何激酶一起使用

通過(guò)使用一套檢測(cè)不變產(chǎn)物ADP的試劑，克服了對(duì)酶家族中單個(gè)成員進(jìn)行耗時(shí)的一次性開發(fā)的需求。該測(cè)定法實(shí)際上可用于任何底物，包括肽底物，蛋白質(zhì)底物和脂質(zhì)底物。

酶標(biāo)靶的例子包括：

• 蛋白激酶
• 脂質(zhì)激酶
• 碳水化合物激酶
• ATP酶
• 伴侶蛋白（Hsp90等）
• 核酸酶
• 羧化酶
• 解旋酶

應(yīng)用領(lǐng)域

• 篩選小分子抑制劑
• 確定酶活性
• 輪廓抑制劑效能/測(cè)定IC ₅₀  值
• 測(cè)量鉛分子與靶的停留時(shí)間/解離速率/解離
• 抑制劑選擇性分析
• 行動(dòng)機(jī)制研究

特征

• 簡(jiǎn)單的均勻生化分析
• 直接檢測(cè)ADP消除了費(fèi)力的耦合步驟
• 非放射性，安全的測(cè)定方法
• 支持HTS –以96孔，384孔或1536孔格式使用
• 從熒光偏振（FP），熒光強(qiáng)度（FI）或時(shí)間分辨的福斯特共振能量轉(zhuǎn)移（TR-FRET）格式中選擇
• 靈敏，穩(wěn)定的ADP檢測(cè)。這意味著多達(dá)可減少10倍的酶，大幅降低大屏幕的成本。
• 與ATP濃度從0.1到1000 µM一起使用
• 遠(yuǎn)紅外示蹤劑進(jìn)一步降低了熒光化合物和光散射的干擾

直接ADP檢測(cè)可大程度地減少干擾

Transcreener ADP ²  激酶檢測(cè)試劑盒依賴于使用專有抗體直接檢測(cè)ADP的能力，該抗體以與ADP的特異性和親和力結(jié)合，與ATP的交叉反應(yīng)性可以忽略。這種出色的選擇性允許在過(guò)量ATP的存在下直接檢測(cè)ADP，這是在初始速度條件下（例如，ATP消耗≤10％）進(jìn)行激酶活性測(cè)定的要求。ADP抗體的高親和力意味著該測(cè)定具有靈敏的檢測(cè)能力，可有效檢測(cè)  Z'值為0.7或更高的低至10 nM的ADP，因此您可以使用更少的珍貴酶。

其他ADP檢測(cè)方法 依賴于復(fù)雜的測(cè)定方案，該方案使用三個(gè)或多個(gè)酶促步驟將ADP轉(zhuǎn)換為可檢測(cè)的信號(hào)。檢測(cè)級(jí)聯(lián)中的每種酶都是被篩選化合物的潛在靶標(biāo)，這會(huì)增加假陽(yáng)性或缺失命中的風(fēng)險(xiǎn)，并需要額外的孔來(lái)進(jìn)行反篩選。

混合讀取格式可以在端點(diǎn)或連續(xù)模式下使用

Transcreener ADP ²含量 測(cè)定均使用均質(zhì)，混合和讀取的含量測(cè)定格式，從而簡(jiǎn)化了自動(dòng)化過(guò)程，并為測(cè)定方案提供了大的靈活性。端點(diǎn)測(cè)定法通常用于HTS，連續(xù)測(cè)定法 用于測(cè)定法開發(fā)或確定激酶抑制劑的停留時(shí)間。

用生化分析方法測(cè)量藥物靶標(biāo)停留時(shí)間的指南

在藥物開發(fā)計(jì)劃期間，對(duì)藥物靶標(biāo)停留時(shí)間的分析可以提高功效，增加治療范圍并降低過(guò)早集中于可能具有不良副作用的候選化合物的風(fēng)險(xiǎn)。本指南提供了有關(guān)使用Transcreener生化測(cè)定法測(cè)量藥物靶標(biāo)停留時(shí)間的概念和技術(shù)的技術(shù)背景，以及示例和案例研究。

了解更多信息，包括：

• 停留時(shí)間的基礎(chǔ)及其對(duì)藥物發(fā)現(xiàn)的重要性
• 停留時(shí)間確定方法的比較
• 使用跳躍稀釋法和Transcreener生化分析
• 數(shù)據(jù)分析用于準(zhǔn)確確定停留時(shí)間
• 測(cè)量激酶，磷酸二酯酶和糖基轉(zhuǎn)移酶的停留時(shí)間的示例

堅(jiān)如磐石的試劑和信號(hào)穩(wěn)定性可確??保高質(zhì)量的數(shù)據(jù)并簡(jiǎn)化自動(dòng)化

Transcreener ADP ²抗體和示蹤劑在室溫下穩(wěn)定至少8小時(shí)。這樣可確保在分配試劑之前將試劑在室溫下存儲(chǔ)或不立即讀取板的情況下不會(huì)影響數(shù)據(jù)質(zhì)量。出色的試劑和信號(hào)穩(wěn)定性使Transcreener ADP ²激酶測(cè)定非?？煽?，易于在自動(dòng)化HTS環(huán)境中使用。

除了為您提供三種檢測(cè)模式的靈活性外，我們還與主要的多模式閱讀器供應(yīng)商（包括Tecan，BMG和Biotek）合作， 為每種Transcreener ADP ² 分析確定宜的儀器硬件和軟件設(shè)置。成功的驗(yàn)證需要在初始速度條件（≤10％ATP轉(zhuǎn)化率）下用于ADP檢測(cè)的Z'大于0.7。每種Transcreener分析的技術(shù)手冊(cè)中都總結(jié)了宜的過(guò)濾器設(shè)置和儀器設(shè)置，并且在應(yīng)用筆記中提供了更詳細(xì)的信息。這樣可以確保無(wú)論您喜歡哪種熒光檢測(cè)模式或閱讀器，使用Transcreener試劑都能獲得可靠的結(jié)果。

TranscreenerADP²激酶檢測(cè)試劑盒

*對(duì)于定制或批量訂單（超過(guò)100,000口井），請(qǐng)聯(lián)系我們（info@bellbrooklabs.com）以獲得報(bào)價(jià)。