該模塊提供 HILIC-UHPLC N-和/或 O-聚糖譜，以及峰的相對定量和主要聚糖種類的初步鑒定。分析將對樣品的單次或三次釋放（通常每次釋放 5-100 µg）、等量（按體積計(jì)）的樣品緩沖液陰性對照、Ludger 陽性和陰性對照以及系統(tǒng)適用性標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。

該模塊適用于：

• 初步聚糖分配

• 質(zhì)量控制 - 配置文件比較以監(jiān)測已知結(jié)構(gòu)

• 監(jiān)控批次間的一致性

• 可比性研究

為了獲得有關(guān)聚糖結(jié)構(gòu)及其相對比例的更詳細(xì)信息，需要進(jìn)行2 級詳細(xì)表征。

樣品類型：

• 生物制藥：mAb、糖蛋白激素（例如促卵泡激素 (FSH) 和促紅細(xì)胞生成素 (EPO)、Fc 融合蛋白、疫苗）

• 細(xì)胞：哺乳動物細(xì)胞系、細(xì)菌細(xì)胞成分

• 生物體液、組織和其他

• SDS 凝膠中的糖蛋白（僅限 N-聚糖）

• COVID19 患者樣本（例如血漿、組織）

• SARS-CoV-2感染的細(xì)胞系

1 級 HILIC 分析的工作流程

N-聚糖通過用 PNGAse F 或 PNGAse A 消化從糖蛋白中釋放出來。
O-聚糖通過肼解或 Orela 試劑從糖蛋白中釋放出來。
釋放的聚糖用 2-AB 或 2-AA 或普魯卡因胺進(jìn)行熒光標(biāo)記，通過 HILIC-HPLC 或 HILIC-UHPLC 進(jìn)行純化和分析。

HILIC-HPLC/UHPLC 提供葡萄糖單位 (GU) 值，用于分析糖鏈分離大致基于糖鏈大小的情況，并允許在樣品和標(biāo)準(zhǔn)之間進(jìn)行直接的分析比較。

報告

最終報告包含：

• 系統(tǒng)適用性標(biāo)準(zhǔn)和 Ludger 陽性對照的 HILIC-UHPLC 配置文件

• 客戶樣品和緩沖液陰性對照的 HILIC-UHPLC 配置文件

• 葡萄糖單位 (GU) 值

• 檢測峰的相對比例

• 調(diào)查結(jié)果摘要

將客戶樣品中的聚糖與 Ludger 的聚糖標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行比較，可以初步鑒定主要的聚糖種類

模塊級別 1：HILIC 分析具有：

N-聚糖分析的4 個選項(xiàng)可供選擇：

1. G-L1N-HILIC - 選項(xiàng) 1：單個樣品釋放的糖譜分析+ 配方緩沖液 + Ludger 對照

2. G-L1N-HILIC - 選項(xiàng) 2：三份樣品釋放的糖譜分析+ 配方緩沖液 + Ludger 對照

3. GX-mAb-LC - 選項(xiàng) 1*：對多達(dá) 43 個客戶樣本和 5 個 Ludger 對照進(jìn)行高通量糖譜分析

4. GX-mAb-LC - 選項(xiàng) 2*：對多達(dá) 91 個客戶樣品和 5 個 Ludger 對照進(jìn)行高通量糖譜分析

* 樣品制備方法將在 96 孔格式的 Hamilton STARlet 液體處理機(jī)器人上進(jìn)行。這是并行分析大量樣品的低成本解決方案，提供所有樣品的基本色譜數(shù)據(jù)，用于比較目的。

O-聚糖分析的2 個選項(xiàng)可供選擇：

1. G-L1O-HILIC-OHy - 選項(xiàng) 1：對三份樣品釋放 + 配方緩沖液 + Ludger 對照進(jìn)行糖譜分析。
   O-聚糖通過肼解釋放。

2. G-L1N-HILIC-ORe - 選項(xiàng) 2：對三份樣品釋放 + 配方緩沖液 + Ludger 對照進(jìn)行糖譜分析。
   Orela 釋放 O-聚糖。