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Haematologic HCXI-0150說明書

 發(fā)布時(shí)間:2018/10/15 點(diǎn)擊量:483

Haematologic HCXI-0150說明書

HTI HCXI-0150

 

Haematologic Technologies,Inc。(HTI)是一家ISO 9001:2015注冊(cè)公司,是一家專業(yè)從事體外研究用高質(zhì)量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點(diǎn)是凝血級(jí)聯(lián)中涉及的蛋白質(zhì),以及骨代謝的調(diào)節(jié)。HTI產(chǎn)品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質(zhì),包括酶原,酶,輔因子和抑制劑,以及單克隆和多克隆抗體的互補(bǔ)系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,用于臨床研究。提供的服務(wù)包括定制蛋白質(zhì)純化,蛋白質(zhì)修飾,化驗(yàn)開發(fā),合同制造和合同研究。

 

Haematologic HCXI-0150說明書

Human Coagulation Factor XI

人凝血因子XI

HCXI-0150 Human Factor XI

 

 

因子XI
的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)表示因子XI單體的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)。鑒定為R1至R4的區(qū)域?qū)?yīng)于四個(gè)串聯(lián)氨基酸序列重復(fù),其終包含因子XIa的重鏈。在因子XIIa的蛋白水解活化期間,包含因子XIa的輕鏈的“催化結(jié)構(gòu)域”從重鏈區(qū)域切割下來。因子XIa的重鏈和輕鏈通過二硫鍵保持相關(guān)。成熟因子XI分子是由兩個(gè)明顯相同的單體組成的同型二聚體,其通過二硫鍵保持締合。

 

  •  

HCXI-0150 人因XI 

  •  

尺寸

50微克

公式

50%甘油/水(v / v)

  •  

存儲(chǔ)

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

  •  

活動(dòng)決定

凝血試驗(yàn)

保質(zhì)期(妥善保存)

12個(gè)月

  •  

 

因子XI是血漿糖蛋白,其在與高分子量激肽原的非共價(jià)復(fù)合物中循環(huán)(1)。成熟分子在肝臟中合成,是雙鏈同源二聚體,分子量約為160,000(2,3)。據(jù)估計(jì),總質(zhì)量的5%可歸因于碳水化合物(2)。兩種相同的單體具有80,000的分子量,并通過二硫鍵連接在一起。因此,通過SDS-PAGE分析,因子XI表現(xiàn)為單一條帶,非還原(Mr = 160,000)和還原(Mr = 80,000)。

因子XI作為酶原循環(huán)并且需要蛋白水解活化以獲得絲氨酸蛋白酶活性。因子XI向因子XIa的轉(zhuǎn)化由因子XIIa催化,并導(dǎo)致每個(gè)單體(3)中Arg369-Ile370鍵的裂解。因子XIa由兩個(gè)NH2-末端衍生的重鏈和兩個(gè)COOH-末端衍生的輕鏈組成,所有這些輕鏈通過二硫鍵保持在一起。因子XIa通過催化因子IX向因子IXa的轉(zhuǎn)化而參與凝血的內(nèi)在途徑。一種稱為血漿促凝血酶原激酶前因缺陷的出血性疾病是由缺乏因子XI促凝血活性引起的(4,5)。在因子XI缺陷患者中觀察到的可變的出血傾向與因子XI活性或抗原水平無關(guān)。

從歷*看,因子XI由于其相對(duì)較低的血漿濃度及其對(duì)蛋白水解的敏感性而難以純化(6)。因子XI從新鮮冷凍血漿中純化,其通過添加的抑制劑穩(wěn)定。首先用BaCl 2處理血漿以除去維生素K依賴性蛋白質(zhì),然后通過親和層析分離因子XI。在肝素瓊脂糖凝膠上的終色譜步驟產(chǎn)生完整因子XI的均勻制備。成品以50%(vol / vol)甘油/ H2O供應(yīng),應(yīng)儲(chǔ)存在-20oC。

凝膠

Novex 4-12%Bis-Tris

加載

人因子XI,每泳道1μg

緩沖

MOPS

標(biāo)準(zhǔn)

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

特別說明

由于存在高達(dá)50%的β形式,重鏈?zhǔn)请p重鏈。α-Xa向β-Xa的轉(zhuǎn)化通過α-Xa對(duì)α-Xa的自動(dòng)切割發(fā)生,導(dǎo)致COOH末端肽的喪失。

 

 

本土化

等離子體; 與高分子量激肽原相關(guān)

血漿濃度

2-7μg/ ml(2,3,7,8)

行動(dòng)方式

酶原; 絲氨酸蛋白酶因子XIa的前體

分子量

160,000(人類)(2,3)

消光系數(shù)

Ë

1%

1厘米,280納米

 

= 13.4(人類)(2)

 

等電點(diǎn)

8.9-9.1

結(jié)構(gòu)體

同二聚體由兩個(gè)明顯相同的亞基(Mr~80,000)組成,由二硫鍵連接在一起。單體含有四個(gè)串聯(lián)氨基酸重復(fù)序列,與血漿前激肽釋放酶具有同源性(9)。

碳水化合物百分比

5%(人)(2)

  1. Thompson,RE,et al。,J.Clin。Invest。,60,1376(1977)。
  2. Kurachi,K。和Davie,EW,Biochemistry,16,5831(1977)。
  3. Bouma,BN和Griffen,JH,J.Biol。Chem。,252,6432(1977)。
  4. Rosenthal,RL,et al。,Proc。SOC。進(jìn)出口。生物學(xué)。Med。,82,171(1953)。
  5. Forbes,CD和Ratnoff,J.,J。Lab。臨床。Med。,79,113(1972)。
  6. Kurachi,K。和Davie,EV,Methods Enzymol。,80,211(1981)。
  7. Wuepper,KD,美聯(lián)儲(chǔ)。Proc。,31,624(1972)。
  8. Saito,H。和Goldsmith,G.,Blood,50,377(1977)。
  9. Fujikawa,K。等,Biochemistry,25,2417(1986)。

 

 

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