omegabiotek M3298-01說(shuō)明書(shū)
使用磁珠從血漿或血清中分離循環(huán)的無(wú)細(xì)胞DNA。
SKU：M3298-01
類(lèi)別：循環(huán)DNA
標(biāo)簽：cfDNA，M3298-00，M3298-01，M3298-02，NIPT
Mag-Bind®cfDNA試劑盒專(zhuān)為從500-8,000μL血漿或血清樣品中快速可靠地分離循環(huán)DNA而設(shè)計(jì)。Mag-Bind®cfDNA試劑盒可以手動(dòng)或在自動(dòng)化平臺(tái)上進(jìn)行處理。該程序消除了對(duì)漏斗和真空步驟的需要，在自動(dòng)化協(xié)議中提供免提操作。
*配方的結(jié)合緩沖液允許以自動(dòng)化形式處理大量樣品，允許在24孔板形式的單個(gè)孔中處理4mL血清或血漿。Mag-Bind®顆粒CH的磁響應(yīng)允許在需要大體積的步驟中快速磁化，并且高結(jié)合容量允許減少所需的磁性顆粒量，從而將4mL血清或血漿樣品的洗脫體積降低至50μL 。
Mag-Bind®cfDNA試劑盒也已自動(dòng)化，可在Hamilton平臺(tái)上處理8 mL樣品。請(qǐng)聯(lián)系我們獲取自動(dòng)化支持。
協(xié)議適用于以下自動(dòng)化平臺(tái)：
僅供研究使用。不用于診斷過(guò)程。
| 特征 | 產(chǎn)品規(guī)格 |
|---|---|
| 樣品類(lèi)型 | 血漿/血清 |
| 樣本量 | 500-8000μL |
| 技術(shù) | 磁珠 |
| 處理 | 手動(dòng)或自動(dòng) |
| 自動(dòng)化 | 是 |
| 處理時(shí)間 | 96（1mL）樣品2小時(shí) |
| 格式 | 管，24孔，96孔 |
| 洗脫體積 | 50μL |
套件組件
Mag-Bind®顆粒CH
DS緩沖區(qū)
JSB緩沖區(qū)
GT7緩沖區(qū)
SPW緩沖區(qū)
洗脫緩沖液
蛋白酶K溶液
使用Omega Bio-tek的Mag-Bind®cfDNA試劑盒純化的無(wú)細(xì)胞DNA幾乎沒(méi)有基因組DNA物
圖1. 來(lái)自4 mL血清的純化DNA的電泳圖重疊。使用來(lái)自O(shè)mega Bio-tek和Company Q的試劑盒按照制造商推薦的方案純化4mL未加標(biāo)血清。在Agilent的TapeStation®2200上分析純化的DNA。
使用Omega Bio-tek的Mag-Bind®fCRDNA試劑盒純化的無(wú)細(xì)胞DNA的高質(zhì)量和高產(chǎn)量Mag-Bind®cfDNA試劑盒
圖2. 來(lái)自1 mL血清的純化DNA的電泳圖覆蓋圖 。將剪切的細(xì)菌DNA摻入血清樣品中并使用Omega Bio-tek的Mag-Bind cfDNA試劑盒和來(lái)自Company Q的基于柱的試劑盒進(jìn)行分離。使用16s細(xì)菌特異性引物以1X和10X稀釋度進(jìn)行實(shí)時(shí)PCR。在Agilent的TapeStation®2200上分析純化的DNA .Omega Bio-tek試劑盒能夠捕獲沒(méi)有基因組DNA污染的循環(huán)無(wú)細(xì)胞DNA。相反，Company Q的洗脫液含有高分子量片段，表明在循環(huán)DNA分離中存在基因組DNA。
使用Omega Bio-tek的cfDNA試劑盒純化的cfDNA不含PCR抑制劑
表1. 對(duì)從純化的樣品中分離的未稀釋和10倍稀釋的DNA一式三份進(jìn)行具有16S細(xì)菌特異性引物的實(shí)時(shí)PCR [圖2]。數(shù)據(jù)顯示純化的DNA不含PCR抑制劑，并且特定的cfDNA濃度高于公司Q.
使用Mag-Bind®cfDNA試劑盒可以回收小至50 bp的循環(huán)無(wú)細(xì)胞DNA
圖3. 使用修改的方案可以回收小至50bp的DNA片段。加入50bp DNA梯度的血清用Mag-Bind®cfDNA試劑盒純化。通過(guò)使用修改的協(xié)議，回收了較小的片段。
使用Mag-Bind®cfDNA試劑盒分析從8 mL血漿中純化的cfDNA
圖4.1。 使用Mag-Bind®cfDNA試劑盒純化血漿樣品。將純化的DNA樣品加載到TapeStation 2200上的D100高靈敏帶上。
圖4.2。 使用TapeStation軟件分析圖4.1中的凝膠圖像。峰值和濃度數(shù)據(jù)顯示8 mL自動(dòng)化過(guò)程是成功的。
圖4.3。 使用TapeStation軟件分析圖4.1中的凝膠圖像。疊加顯示純化的DNA含有更多的cfDNA和小的基因組DNA污染。
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