線性PEI轉(zhuǎn)染說明書
化學(xué)名：線性聚乙烯亞胺，線性PEI，聚乙烯亞胺，線性，MW 25000，轉(zhuǎn)染級
訂貨號＃： 9002-98-6 規(guī)格：1G 品牌：BIOHUB CAS＃： 9002-98-6,26913-06-4
分子式：（CH2CH2NH）n 分子量： 25,000 熔點： 73-75º
溶于：熱水，低pH冷水，甲醇和乙醇。 不溶于：苯，乙酉迷和丙酮
外觀：白色至黃色固體 處理：手套和通風(fēng)櫥
儲存：在室溫下避光干燥儲存
配置：1：稱取100mg線性聚乙烯亞胺，加新鮮的細(xì)胞級別的水90ml，加鹽酸至PH=3左右， 加熱至80℃左右攪拌過夜溶解PEI，
2：用氫氧化鈉溶液調(diào)整pH值至7.0 ，定容至100ml，用0.22um的濾器過濾，分裝后儲存于4℃，保質(zhì)期可以達到12個月。
轉(zhuǎn)染試劑和DNA配比數(shù)據(jù)
細(xì)胞型號 | 培養(yǎng)基 | 每孔細(xì) 胞數(shù) | DNA的量 | 轉(zhuǎn)染試劑量 | 和培養(yǎng)基混合 4-6h |
293H | DMEM | 3×104 | 0.2µg | 0.5µL | DMEM+10%FBS |
293FT | DMEM | 3×104 | 0.2µg | 0.5µL | DMEM+10%FBS |
293E | DMEM | 3×104 | 0.2µg | 0.5µL | DMEM+10%FBS |
293F | DMEM | 3×104 | 0.2µg | 0.5µL | DMEM+10%FBS |
COS7 | DMEM | 1.5×104 | 0.4µg | 0.5µL | DMEM+10%FBS |
hela | DMEM | 2×104 | 0.3µg | 0.5µL | 1640+15%FBS |
Caco2 | MEM | 3.5×104 | 0.3µg | 0.75µL | MEM+10%FBS |
BHK21 | MEM | 2×104 | 0.2µg | 0.5µL | MEM+10%FBS |
CHO-DG44 | DMEM+HT+pro | 2×104 | 0.5µg | 0.5µL | DMEM+HT+pro +10%FBS |
RAW264.7 | DMEM | 3×104 | 0.2µg | 0.5µL | DMEM +10%FBS |
MCF7 | MEM/NEAA+0.01mg/mL insulin + sodium pyruvat | 2×104 | 0.1µg | 0.25µL | MEM/NEAA+0.01mg/mL insulin + sodium pyruvat+10%FBS |
SW480 | IMDM | 3×104 | 0.4µg | 0.5µL | IMDM +10%FBS |
MDCK | DMEM | 4×104 | 0.6µg | 1µL | DMEM+10%FBS |
CHO-K1 | IMDM+Pro | 3×104 | 0.2µg | 0.5µL | IMDM+Pro +10%FBS |
HepG2 | DMEM | 3×104 | 0.5µg | 0.75µL | DMEM+10%FBS |
A549 | DMEM | 2×104 | 0.3µg | 0.5µL | DMEM+10%FBS |
NIH/3T3 | DMEM | 1.5×104 | 0.1µg | 0.75µL | DMEM+10%FBS |
vero | DMEM | 3×104 | 0.3µg | 0.75µL | DMEM+10%FBS |
sf9 | SIM SF | 5×104 | 0.4µg | 0.75µL | SIM SF+10%FBS |
轉(zhuǎn)染效率
細(xì)胞種類 | 中文名稱 | PEI 轉(zhuǎn)染效率 |
HEK293 | 人胚腎細(xì)胞 | 90%-95% |
293-T | 人胚腎細(xì)胞 | 90%-95% |
CHO-K1 | 倉鼠卵巢細(xì)胞 | 80%-90% |
U251 | 人源神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 | 80%-90% |
Hela | 人源宮頸癌細(xì)胞 | 70%-80% |
COS7 | 猴SV40轉(zhuǎn)化腎細(xì)胞 | 70%-80% |
HepG2 | 人源肝癌細(xì)胞 | 70%-80% |
NIH/3T3 | 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 | 60%-70% |
膠質(zhì)瘤干細(xì)胞 | 人源膠質(zhì)瘤干細(xì)胞 | 60%-70% |
Patu8988 | 人源胰腺癌細(xì)胞 | 60%-70% |
U2OS | 人源骨肉瘤細(xì)胞 | 60%-70% |
